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醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)范

  • Jason Peng

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  • 2022-07-23  |  Visits:


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自新式冠狀病毒感柒的病毒性肺炎新冠疫情出現(xiàn)至今,各省市都是在標(biāo)準(zhǔn)疫情防控工作中,大家對(duì)核酸檢測(cè)這個(gè)詞愈來(lái)愈了解。說(shuō)起核酸檢測(cè),迫不得已提挪動(dòng)核酸檢測(cè)工作平臺(tái)——PCR艙實(shí)驗(yàn)室。

一.PCR實(shí)驗(yàn)室PCR擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室人流物流設(shè)計(jì)規(guī)范

PCR擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室人流物流設(shè)計(jì)規(guī)范
1)、試劑存儲(chǔ)和準(zhǔn)備區(qū)。貯存試劑和用于標(biāo)本制備的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運(yùn)送至試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū),不能經(jīng)過(guò)擴(kuò)增檢測(cè)區(qū),試劑盒中的陽(yáng)性對(duì)照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū),應(yīng)當(dāng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。
?2)、標(biāo)本制備區(qū)。針對(duì)有可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,可通過(guò)在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件,避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染,加入待測(cè)核酸后,必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對(duì)具有潛在傳染危險(xiǎn)性的材料,必須在生物安全柜內(nèi)開(kāi)蓋,并有明確的樣本處理和滅活程序。
3)、擴(kuò)增區(qū)。為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)當(dāng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動(dòng)。必須注意的是,所有經(jīng)過(guò)檢測(cè)的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開(kāi)。
4)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。核酸擴(kuò)增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法、直接或酶切后瓊 脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、核酸測(cè)序方法、質(zhì)譜分析等。

PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖 PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖
   

三.PCR實(shí)驗(yàn)室試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)操作規(guī)范

PCR實(shí)驗(yàn)室試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)操作規(guī)范
實(shí)驗(yàn)區(qū)的主要操作是儲(chǔ)存試劑的制備、試劑的分包裝和主反應(yīng)混合物的制備。用于標(biāo)本生產(chǎn)的試劑和材料應(yīng)直接運(yùn)輸?shù)皆搮^(qū)域,不得通過(guò)其他區(qū)域。試劑原料必須儲(chǔ)存在該區(qū)域,并制備所需的儲(chǔ)存試劑。這個(gè)區(qū)域?qū)饬鲏毫Φ目刂茮](méi)有嚴(yán)格的要求。該地區(qū)的主要操作是保存臨床標(biāo)本和核酸(RNA、DNA)提取、存儲(chǔ)和添加到擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)cDNA的合成。區(qū)域的壓力梯度要求為:相對(duì)于相鄰區(qū)域的正壓,以避免從相鄰區(qū)域進(jìn)入該區(qū)域的氣溶膠污染。此外,由于在樣品添加過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠污染,因此應(yīng)避免在該區(qū)域不必要的行走。

PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖 PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖
   

三.PCR實(shí)驗(yàn)室分析區(qū)域操作規(guī)范

PCR實(shí)驗(yàn)室分析區(qū)域操作規(guī)范
這個(gè)區(qū)域的主要操作是測(cè)量擴(kuò)增片段。如果使用全自動(dòng)封閉分析儀器進(jìn)行檢測(cè),則不能設(shè)置該區(qū)域。區(qū)地區(qū)是擴(kuò)增產(chǎn)物污染的主要來(lái)源,因此該地區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于相鄰區(qū)域的負(fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從該地區(qū)擴(kuò)散到其他地區(qū)

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